11月11日，中國抗癌協(xié)會腫瘤病理專業(yè)委員會分子病理協(xié)作組和腫瘤標志專業(yè)委員會遺傳性腫瘤標志物協(xié)作組聯(lián)合編撰的《腫瘤突變負荷檢測及臨床應用中國專家共識（2020年版）》在《中國癌癥防治雜志》正式發(fā)表，共識圍繞TMB的定義、臨床意義、檢測標準化及與其他免疫標志物如PD-L1、dMMR/MSI-H的關(guān)系等要點，為臨床提供8條TMB檢測及應用共識推薦，以期最大可能提高免疫檢查點抑制劑（ICIs）治療療效預測的準確性和可靠性。

1、TMB的定義

專家共識：TMB一般是指特定區(qū)域內(nèi)體細胞非同義突變的個數(shù)，通常用每兆堿基有多少個突變表示（XX個突變/Mb）。TMB評估受樣本質(zhì)量和數(shù)量、檢測基因組大小、生信分析方法等多種因素影響，臨床應用前應了解TMB的適用范圍。不同檢測方法獲得的TMB應進行系統(tǒng)評估，判斷是否具有可比性。TMB數(shù)值可反映腫瘤內(nèi)產(chǎn)生腫瘤新抗原的潛力，與DNA修復缺陷密切相關(guān)，在多種腫瘤中dMMR和MSI-H患者具有較高的TMB。

2、TMB的臨床意義

2.1 組織TMB可作為免疫治療獨立的療效預測生物標志物

專家共識：組織TMB（tTMB）是一個新興的獨立ICIs治療療效預測標志物，與多種腫瘤類型ICIs單藥或兩種ICIs聯(lián)合治療的療效相關(guān)，已證實可作為泛癌種免疫治療療效的預測標志物。推薦既往標準治療后疾病進展且沒有更好替代療法的實體瘤患者，尤其是高TMB的患者進行TMB檢測，有助于擴大免疫治療獲益人群。中國人群 TMB的獨立預測價值仍需更多前瞻性研究驗證。

2.2 血液TMB與tTMB具有顯著相關(guān)性

專家共識：目前研究證據(jù)顯示在NSCLC中血液TMB（bTMB）與tTMB具有顯著相關(guān)性，但bTMB檢測無統(tǒng)一標準。多項回顧性研究發(fā)現(xiàn)高bTMB與NSCLC患者接受單藥ICIs治療獲益顯著相關(guān)，但尚未獲得高級別前瞻性臨床研究證實。

3、TMB檢測的標準化

3.1 樣本收集、處理原則

專家共識：推薦使用近期石蠟包埋腫瘤組織樣本進行tTMB檢測，待檢測組織應首先完成病理質(zhì)控并確保惡性腫瘤細胞數(shù)能夠滿足檢測要求。為過濾胚系突變對后續(xù)tTMB評估的影響，應采集患者外周血、唾液或正常組織作為對照樣本。建議優(yōu)先采用NMPA批準上市的核酸提取試劑盒進行基因組DNA提取，tTMB檢測實驗室應根據(jù)實際需求建立合適的DNA樣品質(zhì)控標準和操作流程，對待測DNA樣品純度、濃度及片段化程度進行嚴格質(zhì)控。腫瘤原發(fā)灶與遠處轉(zhuǎn)移灶組織均可用于tTMB評估。

3.2 TMB檢測的Panel設(shè)計和平臺選擇

專家共識：采用靶向測序Panel進行TMB評估時，建議與WES評估的TMB進行一致性評價。靶向測序Panel覆蓋范圍原則上不應＜1.0 Mb，最低有效測序深度應≥500×。建議進行TMB檢測的靶向測序Panel盡可能涵蓋患者更多的其他分子遺傳信息，包括可指導靶向治療的驅(qū)動基因突變、與基因變異產(chǎn)生相關(guān)的免疫治療正向預測因子以及可能的免疫治療負向預測因子。目前已有多款NGS測序儀獲國家NMPA批準用于臨床基因檢測，不同實驗室可依據(jù)樣本量、時效要求選擇不同測序平臺。

3.3 TMB算法的標準化要求

專家共識：基于靶向測序Panel的TMB檢測應以WES檢測為金標準，納入影響蛋白質(zhì)編碼的體細胞突變，應保證檢出突變頻率≥5%的體細胞突變，以保證TMB檢測值的準確性和穩(wěn)定性；應依托ICIs療效隨訪數(shù)據(jù)庫對基因組比對和突變檢出算法開展標準化研究；Panel檢測區(qū)域可影響TMB值，應通過至少1 000例WES數(shù)據(jù)予以校正。同時建議使用對照樣本過濾胚系變異。

3.4 TMB閾值的探索與臨床應用

專家共識：TMB值在不同癌種中存在顯著差異，應依據(jù)ICIs臨床療效確定閾值，才能最大可能篩選出ICIs治療的潛在獲益人群。值得注意的是，不同靶向測序Panel的TMB檢測體系之間TMB閾值不能通用。

3.5 TMB報告模板的初步建議

專家共識：TMB報告內(nèi)容除重點描述TMB計算原則和數(shù)值外，還應針對癌種的免疫治療意義進行解讀；同時還需系統(tǒng)評估Panel檢測的各種驅(qū)動基因突變情況，以全面解患者的腫瘤生物學特征，建議應用分子腫瘤診治專家組模式（MTB）進行臨床輔助決策。

4、TMB聯(lián)合應用展望

作為一個新興的ICIs治療療效預測標志物，TMB在臨床應用中還處于初始階段，檢測技術(shù)還在不斷完善，臨床意義也在不斷豐富。最近有研究發(fā)現(xiàn)，TMB與其他腫瘤免疫治療相關(guān)標志物（如PD-L1、MSI）聯(lián)合應用，或能提高免疫治療療效預測的準確性和精確性，但具體的聯(lián)合策略還需要進一步探索。

參考資料：

中國抗癌協(xié)會腫瘤標志專業(yè)委員會遺傳性腫瘤標志物協(xié)作組， 中國抗癌協(xié)會腫瘤病理專業(yè)委員會分子病理協(xié)作組. 腫瘤突變負荷檢測及臨床應用中國專家共識（2020年版）[J]. 中國癌癥防治雜志， 2020， 12(5): 485-494.